本文结合实验数据,对Biolaminin521(LN521)在人多能干细胞培养中的成本控制、细胞扩增能力以及单位细胞培养效率进行分析,帮助研究人员理解全长LN521在hPSC培养中的应用价值。 图1.从早研到临床转化均适用的laminin521二、Biolaminin521(LN521)主要特点LN521属于人重组全长层粘连蛋白,与传统动物来源培养基质相比,其具有更高生理相关性和更好的实验一致性 结果显示,在多个培养周期中,LN521培养体系均表现出较高的细胞扩增倍数以及更快的细胞生长速度。 与截短型层粘连蛋白、EHS来源基质以及Vitronectin体系相比,LN521在不同细胞系中均获得更高扩增表现。 由于LN521培养体系能够获得较高细胞产量以及更快增殖速度,因此单位细胞培养成本表现更低。实验结果显示,在单次传代周期内,LN521体系获得的单位细胞培养成本低于部分对照体系。
其中,LN521、LN111与LN411是目前肝细胞培养与肝类器官研究中较受关注的几种全长层粘连蛋白。 研究发现,与传统Matrigel相比,在LN521以及LN521/LN111(1:3)体系中培养的hESC来源肝细胞,表现出更典型的原代肝细胞样外观,并形成更加有序的排列结构。 图5:LN521和LN111与Matrigel对比培养的hPSC来源肝细胞ALB与CYP3A表达水平。此外,LN521还支持hPSC来源肝母细胞的长期扩增。 在3D培养领域,LN521与LN111展现出较高应用价值。基于LN521建立的无支架肝模型,可以支持hPSC向肝祖细胞、内皮细胞以及肝星状细胞等多种肝脏相关细胞分化,从而构建更加复杂的肝脏组织结构。 六、总结LN521、LN111与LN411等全长层粘连蛋白,正在逐渐成为肝细胞培养与3D肝类器官研究中的重要培养基质。